Выделение ДНК
Выделение ДНК – первоначальный этап при проведении полимерной цепной реакции.
Общая информация
Обработка клинического материала и получение дезоксирибонуклеиновой кислоты – важнейший этап молекулярно-биологического исследования.
Используемый элемент для исследования на определение возбудителей ИППП представляет сложную многокомпонентную систему, которая вмещает много ингибиторов, тормозящих амплификацию.
Зачастую сам механизм включает следующие стадии:
- быстрое растворение клеток;
- устранение клеточных органелл;
- ферментативная деструкция;
- экстрагирование белков;
- осаждение молекул в этиловом спирте.
Процесс проведения процедуры
Подготовка
Для выделения геномной ДНК берут 300 мМ ацетат натрия, 50 мМ ЭДТА , pH 7,5. Перед самим использованием вливают буферный раствор. Затем его кипятят в дистиллированной воде, около десяти минут, потом охлаждают пять минут во льду. Затем готовят саркозин. Для его приготовления требуется 10% данного раствора, а также стерильная вода, которую прогревают при 65оС один час.
Для выделения плазменной ДНК с вечера засевают культуру бактерий в 5мл LB с антибиотиком и оставляют на столе. С утра ее доращивают при 37оС и интенсивно взбалтывают.
Для выделения ДНК из крови берут свежую кровь, антикоагулянт, фильтрованную бумагу (марлю) для последующего пропитывания и образования нужного компонента.
Для выделения ДНК для ПЦР проводится лизис микроорганизма и экстракция нуклеиновой кислоты.
Выделение ДНК
Для получения геномной кислоты вносят метилкарбинол или пропанол в подготовленный образец. В результате образовываются фрагменты, пригодные для выполнения блот-гибридизации и клонирования в бактериофаге. Затем клетки промывают в 20мл холодного фосфато-солевого раствора. Далее их ресуспендируют.
Чтобы выделить плазменную дезоксирибонуклеиновую кислоту, заранее прогретый материал осаждают в эппендорфе. Затем обрабатывают в азоте. Далее подливают гидроксид натрия и аккуратно перемешивают, инкубируют 5 минут. После взбалтывают и отстаивают. Затем обрабатывают фенол-хлороформом. После этого сушат для выпадения осадка при 65оС. Приготовленный компонент растворяют в деионизованной жидкости.
Чтобы выделить образец из крови, в пробирку присаживают 0,5 мл лизирующего вещества, а также 20 мкл жидкой крови, вносят 15 мкл протеиназы и смешивают. Выдерживают при температуре 65 оС в течение 1-3 часов. После этого добавляют равный объем фенола и центрифугируют три минуты.
В случае выделения макромолекулы для ПЦР происходит простое кипячение с дальнейшим замораживанием и оттаиванием в присутствии лизоцима. Для этого применяются специальные буферы, содержащие детергенты и протеиназу.
Реабилитационный период
После этой процедуры не предусмотрена реабилитация пациента.
Показания
Основные показания: гепатит, менингит, сепсис, плеврит, артрит, паротит, венерические болезни, простатит, туберкулез.
Противопоказания
Противопоказаний не выявлено.
Осложнения
Как правило, никаких последствий после проведения манипуляций не наблюдается.
Цены и клиники
Обследование выполняют в частных медицинских учреждениях врачи-генетики. Чтобы узнать более подробные сведения о графике работы специалиста, стоимости приема и месте расположения клиники, воспользуйтесь медицинским порталом medbooking.com.
Лучшее предложение
-
Проспект Мира
-
Проспект Мира
-
Достоевская
-
Тверская
-
Пушкинская
-
Чеховская
-
Баррикадная
-
Проспект Мира
-
Проспект Мира
-
Достоевская
-
Рижская
-
Марьина роща
-
Достоевская
-
Рижская
-
Белорусская
-
Динамо
-
Менделеевская
-
Петровский парк
-
Проспект Мира
-
Проспект Мира
-
Достоевская
-
Тверская
-
Пушкинская
-
Чеховская
-
Баррикадная
-
Проспект Мира
-
Проспект Мира
-
Достоевская
-
Рижская
-
Марьина роща
-
Достоевская
-
Рижская
Лучшее предложение
«СМ-Клиника» на Старопетровском проезде - это самый первый медицинский центр холдинга, который открылся в 2002 году. Данная клиника смогла собрать отличную команду квалифицированных и...
-
Балтийская
-
Балтийская
-
Войковская
-
Аэропорт
-
Сокол
Институт Стволовых Клеток Человека – это биотехнологическое медицинское учреждение в России, которое специализируется на создании новых медицинских препаратов и услуг в регенеративной сфере,...
-
Академическая
-
Ленинский проспект
-
Площадь Гагарина
-
Молодёжная
Лучшее предложение
-
Проспект Мира
-
Проспект Мира
-
Достоевская
-
Тверская
-
Пушкинская
-
Чеховская
-
Баррикадная
-
Проспект Мира
-
Проспект Мира
-
Достоевская
-
Рижская
-
Марьина роща
-
Достоевская
-
Рижская
-
Белорусская
-
Динамо
-
Менделеевская
-
Петровский парк
-
Проспект Мира
-
Проспект Мира
-
Достоевская
-
Тверская
-
Пушкинская
-
Чеховская
-
Баррикадная
-
Проспект Мира
-
Проспект Мира
-
Достоевская
-
Рижская
-
Марьина роща
-
Достоевская
-
Рижская
-
Тульская
-
Шаболовская
-
ЗИЛ
-
Верхние Котлы
-
Крымская
«Медицина» — многопрофильное учреждение, оказывающее медицинскую помощь более чем по 60 направлениям. На его базе функционируют поликлиника, стационар, скорая помощь и...
-
Маяковская
-
Белорусская
-
Белорусская
-
Новослободская
СМ-Клиника — сеть медицинских центров включает свыше 15 многопрофильных медучреждений, предоставляющих широкий спектр лечебно-диагностических услуг. Техническая база клиники позволяет...
-
Менделеевская
-
Белорусская
-
Белорусская
-
Новослободская
-
Достоевская
-
Маяковская
-
Текстильщики
-
Печатники
-
Кузьминки
-
Волжская
-
Кожуховская
-
Котельники
-
Угрешская
-
ВДНХ
-
Алексеевская
-
Ботанический сад
-
Ботанический сад
-
Ростокино
-
Балтийская
-
Коптево
-
Войковская
-
Водный стадион
-
Сокол
-
Петровско-Разумовская
-
Владыкино
-
Владыкино
-
Балтийская
-
Балтийская
-
Войковская
-
Аэропорт
-
Сокол
-
Молодёжная
-
Кунцевская
-
Кунцевская
-
Крылатское
-
Пионерская
-
Славянский бульвар
-
Войковская
-
Сокол
-
Водный стадион
-
Аэропорт
-
Тимирязевская
-
Тимирязевская
-
Речной вокзал
-
Пятницкое шоссе
-
Сходненская
-
Алтуфьево
-
Планерная
-
Беломорская
-
Динамо
-
Савёловская
-
Белорусская
-
Белорусская
-
Менделеевская
-
Новослободская
-
Войковская
-
Сокол
-
Аэропорт
-
Водный стадион
-
Петровско-Разумовская
-
Владыкино
-
Владыкино
-
ВДНХ
-
Алексеевская
-
Ботанический сад
-
Ботанический сад
-
Ростокино
-
Курская
-
Чкаловская
-
Севастопольская
-
Чертановская
-
Варшавская
-
Речной вокзал
-
Водный стадион
-
Ховрино
-
Беломорская
-
Крылатское
-
Молодёжная
-
Ховрино
-
Водный стадион
-
Речной вокзал
-
Беломорская
-
Войковская
-
Сокол
-
Стрешнево
-
Балтийская
-
Балтийская
-
Войковская
-
Аэропорт
-
Сокол
-
Войковская
-
Сокол
-
Водный стадион
-
Аэропорт
-
Тимирязевская
-
Тимирязевская
-
Динамо
-
Савёловская
-
Белорусская
-
Белорусская
-
Менделеевская
-
Новослободская
Лучшее предложение
-
Проспект Мира
-
Проспект Мира
-
Достоевская
-
Тверская
-
Пушкинская
-
Чеховская
-
Баррикадная
-
Проспект Мира
-
Проспект Мира
-
Достоевская
-
Рижская
-
Марьина роща
-
Достоевская
-
Рижская
-
Белорусская
-
Динамо
-
Менделеевская
-
Петровский парк
-
Проспект Мира
-
Проспект Мира
-
Достоевская
-
Тверская
-
Пушкинская
-
Чеховская
-
Баррикадная
-
Проспект Мира
-
Проспект Мира
-
Достоевская
-
Рижская
-
Марьина роща
-
Достоевская
-
Рижская